上海富衡 | 实验室细胞培养箱爆菌的应对策略

细胞培养箱作为实验室细胞培养的核心设备，为细胞营造稳定适宜的生长环境。然而，一旦发生爆菌现象，不仅会导致细胞培养失败，还可能对整个实验室环境造成污染，影响后续实验。因此，迅速有效地解决细胞培养箱爆菌问题至关重要。

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1. ️移除与清理：一旦发现细胞培养箱爆菌，首先需将培养箱内所有细胞培养物、试剂及耗材全部移出。这些物品可能已受污染，若继续留在箱内，会成为新的污染源。同时，仔细清理箱内的冷凝水托盘、搁板等部件，因为这些地方容易积聚细菌和杂质。使用干净的湿布或海绵擦拭，去除可见的污垢和水渍。
2. ️深度消毒：采用合适的消毒剂对培养箱内部进行全面消毒。常见消毒剂如 75% 乙醇、过氧乙酸、含氯消毒剂等都可选用，但需注意不同消毒剂的适用范围和使用方法。例如，75% 乙醇常用于表面擦拭消毒，使用时需确保擦拭全面且不留死角。过氧乙酸具有强氧化性，可有效杀灭各类细菌和芽孢，但需按照规定比例稀释后使用，且使用后要注意通风散味。对于培养箱的各个角落、内壁、门缝等部位，都要用消毒剂充分擦拭或喷雾消毒，确保消毒无遗漏。消毒后，关闭培养箱门，让消毒剂作用一段时间，以达到最佳消毒效果。

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1. ️高温灭菌（适用于部分可耐受高温部件）：对于培养箱中一些可拆卸且耐高温的部件，如部分金属搁板、托盘等，可采用高温高压灭菌的方法。将这些部件放入高压蒸汽灭菌锅中，在 121℃，15 - 20 分钟的条件下进行灭菌，可彻底杀灭细菌及其芽孢。灭菌后，待部件冷却至室温，再重新安装回培养箱，以确保这些部件完全无菌。
2. ️紫外线照射：紫外线具有杀菌作用，可在培养箱内部放置紫外线灯进行照射消毒。关闭培养箱门，开启紫外线灯，照射时间通常为 30 分钟至 1 小时。紫外线可破坏细菌的 DNA 结构，从而达到杀菌目的。但需注意，紫外线对人体有害，在照射过程中人员应避免直视紫外线光源，并确保培养箱周围无人，防止紫外线对人体造成伤害。同时，紫外线穿透力较弱，对于一些遮挡部位可能消毒效果不佳，因此需结合其他消毒方法使用。
3. ️化学熏蒸：对于一些难以通过擦拭和紫外线照射彻底消毒的区域，可采用化学熏蒸的方法。常用的熏蒸剂如甲醛 - 高锰酸钾混合熏蒸。在培养箱内放置一个耐高温的容器，先加入适量高锰酸钾，再缓慢倒入甲醛溶液，迅速关闭培养箱门。甲醛与高锰酸钾反应会产生大量热和气体，释放出的甲醛气体具有强大的杀菌能力，可有效杀灭培养箱内各个角落的细菌。熏蒸时间一般为 12 - 24 小时，熏蒸结束后，需充分通风换气，待甲醛气味散尽后，再使用培养箱。由于甲醛具有毒性和刺激性，操作过程需在通风良好的环境中进行，并严格遵守安全操作规程。

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1. ️严格日常清洁维护：建立规范的细胞培养箱日常清洁制度，定期清理冷凝水托盘，防止积水滋生细菌。每周至少用湿布擦拭培养箱内部一次，去除灰尘和杂质。同时，定期更换培养箱内的空气过滤器，确保进入培养箱的空气洁净无菌。一般每 3 - 6 个月更换一次过滤器，具体更换周期可根据实验室环境和使用频率进行调整。
2. ️规范操作流程：加强实验人员培训，严格规范细胞培养操作流程。在向培养箱内放置或取出细胞培养物时，必须在超净工作台内进行操作，并确保双手、器材等无菌。避免在培养箱附近进行易产生气溶胶的操作，如剧烈振荡培养瓶等，防止细菌通过空气传播进入培养箱。同时，减少培养箱门的开启次数和时间，降低外界细菌进入的机会。
3. ️定期检测监测：定期对培养箱进行微生物检测，可采用培养皿暴露法或棉签擦拭法取样，然后将样本接种到合适的培养基上进行培养，观察是否有细菌生长。建议每月进行一次检测，以便及时发现潜在的污染问题。此外，可在培养箱内放置生物指示剂，如嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢条，定期进行灭菌效果监测，确保培养箱内部始终保持无菌状态。

实验室细胞培养箱爆菌是一个严峻的问题，但只要采取全面清洁与消毒、针对性除菌处理以及强化预防措施等一系列有效方法，就能迅速解决爆菌问题，并预防其再次发生，保障细胞培养工作的顺利进行。