生化诊断试剂技术中的酶法分析与免疫化学分析
在生化诊断试剂技术的发展历程中,酶法分析与免疫化学分析推动着临床生化检测不断向前迈进。它们凭借各自独特的技术优势,在疾病诊断、病情监测等方面发挥着重要作用,为临床医生提供了丰富且准确的诊断信息。
️(化学发光试剂吖啶酯)
️一、酶法分析:从手工到自动化的跨越
1、发展历程:30 年前,我国临床主要采用固定时间测定酶活性的方法,这种方法存在诸多局限性,可分析的酶范围较窄,测定的准确度和精密度也难以满足临床需求。近 20 年,我国临床生化检测实现了跨越式发展,直接引进自动生化分析仪,并采用动力学法连续监测酶活性,跳过了国外采用分光光度法连续监测酶活性的手工阶段。这一转变极大地拓展了可分析的酶范围,提高了测定的准确度和精密度,为临床提供了更广泛、更可靠的信息。
2、技术特点与优势:自动化分析的引入,不仅提升了检测效率,还促进了酶法对代谢物测定的研究与应用。酶法分析模拟体内的生化反应,摒弃了过去采用强碱、强酸、火焰等比较激烈的化学反应,转而采用温和、快捷、无污染的代谢物酶法测定。这种方法具有特异性强、灵敏度高的特点,能够准确地检测出样本中特定代谢物的含量。在血糖检测中,葡萄糖氧化酶法利用葡萄糖氧化酶特异性地催化葡萄糖氧化,通过检测反应过程中产生的物质来确定血糖浓度,为糖尿病的诊断和治疗监测提供了重要依据。离子选择电极的应用日益增多,并作为模块组合参与自动化分析,进一步丰富了酶法分析的检测项目和功能。干化学分析由于具有简便、快捷、准确的优点,也在国内的许多实验室,特别是急诊室广泛采用,使酶法分析在临床应用中更加灵活多样。
️二、免疫化学分析
1、发展轨迹:我国的免疫化学分析起步于 20 世纪 70 年代,当时开展了放射免疫分析,并成功建立了甲胎蛋白、人绒毛膜促性腺激素、胰岛素的放免测定技术。近 20 年来,随着免疫学研究的不断深入,尤其是 80 年代单克隆抗体制备技术的广泛应用,免疫浊度法、酶免疫等检测技术迅速发展。临床化学、免疫学学科与技术之间的交叉和相互渗透,使得免疫化学分析在临床化学检验中的应用越来越广泛。
2、应用领域与重要性:如今,越来越多的临床化学检验采用了免疫学技术。在特种蛋白测定方面,ApoAI、ApoB 等载脂蛋白,脂蛋白(a)、磷酸肌酸激酶同工酶、肌红蛋白、肌钙蛋白、微量白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、α1 - 微球蛋白、铜蓝蛋白等的测定都离不开免疫化学方法。这些特种蛋白的检测对于心血管疾病、肾脏疾病、肿瘤等多种疾病的诊断、病情评估和预后判断具有重要意义。
️三、酶法分析与免疫化学分析的对比与互补
1、优势与局限:酶法分析具有操作简便、检测速度快、成本相对较低等优势,适用于一些常规代谢物的检测。但它也存在一定局限性,对于一些结构复杂、含量极低的物质检测效果不佳。免疫化学分析则具有高灵敏度、高特异性的特点,能够检测出微量的抗原或抗体,在疾病的早期诊断和特异性标志物检测方面具有明显优势。然而,免疫化学分析也面临着试剂成本较高、检测时间较长等问题。
2、相互补充与应用:对于一些疾病的诊断,可能先采用酶法分析进行初步筛查,快速获取一些基本信息;再利用免疫化学分析进行进一步确认和精确检测,提高诊断的准确性。在心肌梗死的诊断中,先用酶法分析检测肌酸激酶等指标进行初步判断,再通过免疫化学分析检测肌钙蛋白等特异性标志物,明确诊断并评估病情严重程度。
️(胆固醇氧化酶)
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