α - Secretase Substrate, Fluorogenic

一、基本信息

️英文名称：α - Secretase Substrate, Fluorogenic

️中文名称：α- 分泌酶荧光底物

️氨基酸序列：Mca - His - Gln - Lys - Leu - Val - Phe - Phe - Ala - Lys (DNP)-NH₂ （三氟乙酸盐形式）

️单字母序列：Mca - HQKLVFFA - K(DNP)-NH₂

️三字母序列：Mca - His - Gln - Lys - Leu - Val - Phe - Phe - Ala - Lys(DNP)-NH₂

️分子量：1499.62

️分子式：C₇₃H₉₄N₁₆O₁₉

️等电点：未明确给出

️CAS 号：未明确提及

供应商：上海楚肽生物科技有限公司

二、结构信息

三、作用机理及研究进展

（一）作用机理

α - Secretase Substrate, Fluorogenic 是 α - 分泌酶的荧光底物，用于测试 α - 分泌酶活性。当 α - 分泌酶作用于该底物时，会在特定的切割位点对底物进行切割。切割后，原本受 DNP 猝灭作用抑制的 Mca 荧光基团被释放出来，从而导致体系荧光强度显著增强 。通过检测荧光强度的变化，就可以定量分析 α - 分泌酶的活性。在体内，α - 分泌酶对 APP 的正常切割可以防止 β - 淀粉样蛋白（Aβ）的大量生成，而 Aβ 的聚集与阿尔茨海默病（AD）的发生发展密切相关 。该荧光底物可以模拟 APP 被 α - 分泌酶作用的过程，为研究 α - 分泌酶在 AD 等相关疾病中的作用机制提供了有力工具 。

（二）研究进展

在阿尔茨海默病研究领域，α - 分泌酶的活性调节一直是研究热点。通过使用 α - Secretase Substrate, Fluorogenic，科研人员可以深入研究不同因素（如药物、基因突变等）对 α - 分泌酶活性的影响，从而为开发 AD 治疗药物提供理论依据 。例如，有研究通过该底物筛选能够增强 α - 分泌酶活性的化合物，期望这些化合物能够促进 APP 向非淀粉样蛋白生成途径转化，减少 Aβ 的产生，进而缓解 AD 症状 。

此外，随着技术的发展，结合其他先进的检测手段（如高分辨率显微镜、质谱技术等），使用 α - Secretase Substrate, Fluorogenic 可以在细胞水平、活体动物模型中更精准地研究 α - 分泌酶的活性变化及其在疾病发生发展过程中的动态作用 。例如，利用荧光成像技术，可以直观地观察到在细胞内不同生理病理状态下，α - 分泌酶对该底物的切割情况，从而为疾病机制研究提供更直观的信息 。

四、溶解保存

（一）溶解

️体外溶解：通常可溶于二甲基亚砜（DMSO），如可配制成 10 mM 的溶液 。在实验中，可根据具体需求选择合适的浓度进行配制。由于该底物在水中的溶解性较差，一般不建议直接用水溶解 。

️体内溶解（动物实验相关）：对于需要进行动物体内实验的情况，可采用多种注射或口服制剂配方来提高其溶解性 。

️注射制剂：

配方 1：DMSO：吐温 80：生理盐水 = 10：5：85 。例如，取 100 μl DMSO 储存液，加入 50 μl 吐温 80，再加入 850 μl 生理盐水 。

配方 2：DMSO：聚乙二醇 300（PEG 300）：吐温 80：生理盐水 = 10：40：5：45 。

配方 3：DMSO：玉米油 = 10：90 。如要制备 1 ml 2.5 mg/ml 的工作溶液，可先取 100 μl 25 mg/ml 的 DMSO 储存液，加入 900 μl 玉米油，混合均匀 。

配方 4：DMSO：20% 磺丁基醚 -β- 环糊精（sbe - β - CD）生理盐水溶液 = 10：90 。

配方 5：2 - 羟丙基 - β - 环糊精：生理盐水 = 50：50 。

配方 6：DMSO：PEG 300：蓖麻油：生理盐水 = 5：10：20：65 。

配方 7：乙醇：聚氧乙烯蓖麻油（cremophor）：生理盐水 = 10：10：80 。

配方 8：先溶解于 cremophor / 乙醇（50：50）混合液，再用生理盐水稀释 。

配方 9：乙醇：玉米油 = 10：90 。

配方 10：乙醇：PEG 300：吐温 80：生理盐水 = 10：40：5：45 。

️口服制剂：

配方 1：悬浮于 0.5% 羧甲基纤维素钠（CMC - Na）溶液 。例如，要制备 100 ml 2.5 mg/ml 的工作溶液，先称取 0.5 g CMC - Na 溶解于 100 ml 超纯水中配制成 0.5% 的溶液，再加入 250 mg 的该底物，制成悬浮液 。

配方 2：悬浮于 0.5% 羧甲基纤维素溶液 。

配方 3：溶解于聚乙二醇 400（PEG 400） 。

配方 4：悬浮于 0.2% 羧甲基纤维素溶液 。

配方 5：溶解于 0.25% 吐温 80 和 0.5% 羧甲基纤维素混合溶液 。

配方 6：与食物粉末混合 。

在选择体内制剂配方时，需根据实验具体情况，参考相关文献方法，谨慎选择，因为不同化合物在不同配方中的溶解性和稳定性存在差异，且需注意新鲜配制以获得最佳效果 。

（二）保存

️粉末状态：建议储存于 - 20 ± 5 °C，在此温度下，其保质期可达 3 年；若储存于 4 °C，保质期为 2 年 。

️溶解于溶剂中：储存于 - 80 °C 时，保质期为 6 个月；储存于 - 20 °C 时，保质期为 1 个月 。为避免反复冻融对底物造成影响，在制备储存液时，建议将其分装成常用体积后再进行储存 。

五、相关多肽

α - Secretase Substrate II, Fluorogenic 也是一种与 α - 分泌酶相关的荧光底物。它是一种内部淬灭的荧光肽底物，含有 β - 淀粉样前体蛋白（APP）的 α - 分泌酶切割位点 。其激发波长（Ex）/ 发射波长（Em） = 340/490 nm，氨基酸序列为 Ac - Arg - {Glu (EDANS)}-Val - His - His - Gln - Lys - Leu - Val - Phe - {Lys (Dabcyl)}-Arg ，分子量为 2118.47，分子式为 C₁₀₀H₁₄₄N₃₀O₂₀S 。与 α - Secretase Substrate, Fluorogenic 类似，它可用于研究 α - 分泌酶的活性及相关机制，但在结构和荧光特性上与 α - Secretase Substrate, Fluorogenic 存在差异，在实际研究中可根据具体实验需求选择使用 。

六、相关文献

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De Simone A, Seidl C, Santos CA, Andrisano V. Liquid chromatographic enzymatic studies with on - line beta - secretase immobilized enzyme reactor and 4 - (4 - dimethylamino phenylazo) benzoic acid / 5 - ((2 - aminoethyl) amino) naphthalene - 1 - sulfonic acid peptide as fluorogenic substrate. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2014 Mar 15;953 - 954:108 - 14.

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