细胞冻存技术

细胞冻存技术

细胞冻存是细胞培养实验室常规操作，通过在低温条件下抑制细胞的新陈代谢和生长，从而实现长期保存细胞的目的。一般有以下情况时我们会采用细胞冻存技术，例如，

1、细胞株需要长期保存；

2、为了规避污染风险，将F0或者F1细胞进行冻存，即使目前传代的细胞受到污染都能够有新鲜细胞使用；

3、随着细胞传代次数逐渐增加，细胞会发生突变，为了保证前后实验结果的一致性，可以使用同样代次细胞；

4、细胞功能和特性研究时，细胞冻存可以保证细胞质量；

5、为了建立细胞资源库，需要对细胞进行冻存，以方便后续科研研究；

6、细胞治疗项目中为了保证项目的延续性，冻存细胞可以持续稳定的供应。

由此可见冻存细胞非常重要。

实验室常见冻存细胞多采用90%胎牛血清和10%DMSO，其次为70%DMEM、20%胎牛血清和10%DMSO。其中️胎牛血清含有丰富的蛋白质和生长因子，可以为细胞提供营养和保护。它还可以吸附细胞表面的冰晶，防止细胞被冰晶损伤。️DMSO作为渗透性保护剂，在梯度降温过程中随着细胞凝结逐渐渗透到细胞内部，降低细胞内外溶液中的电解质浓度，阻止细胞内水分外渗，避免细胞过分脱水皱缩，减少冰晶的生成。

但是作为占比最大的胎牛血清存在批间差异、成分不明确且价格昂贵等问题，一直以来都是科研工作者极力想解决的痛点。另一方面DMSO具有毒性，冻存过程中也会导致一部分的细胞提前死亡。所以实验室工作人员会选择多冻存几支，但是这样也增加了血清使用量，从而导致整个冻存过程成本极高。

综上所述使用方法和痛点，逐渐出现了无血清无DMSO的细胞冻存液，详情见“BioProE细胞冻存液（不含蛋白、DMSO和血清）使用方法”。