土壤 DNA 提取试剂盒｜茁彩生物

产品简介：

本试剂盒能从多类土壤环境样本中纯化总DNA 。高效的裂解缓冲体系搭配研磨珠，可有效处理真菌、细菌等土壤中的各类微生物 。独特的腐殖酸去除剂，可去除土壤样本中的腐殖酸和其他抑制因子 。优化的 缓冲系统可使核酸高效结合到吸附柱上，能够从100-300 mg土壤样本中快速 、可靠地分离高质量完整的 基因组DNA，纯化后的DNA 适用于PCR 、酶切和杂交等下游分子生物学实验。

储存与运输：

Proteinase K 冰袋（wet ice）运输，-20℃保存；其它试剂室温运输，室温储存，有效期12个月。

产品组成：

使用前须知（请仔细阅读）

1. 若 Buffer SA1 、Buffer SLB 、Buffer SGB 、Buffer SD出现沉淀，请于 60℃加热溶解，待恢复至室温后使用。
2. 使用前请向 Buffer SP中加入21mL无水乙醇， 向Buffer PW中加入49mL无水乙醇，混匀后使用。

操作步骤

1. 称取100-300mg（推荐 250 mg）的土壤样本至含有500mg研磨珠（1mm）的2mL离心管中；
2. 向离心管中加入 800μL Buffer SA1 、15μL Proteinase K，涡旋振荡10min；
3. 12,000 rpm（ ~13,400×g）室温离心 5 min，吸取上清转移至一新的 2mL离心管中（上清中可能会存 在碎屑，吸入少量不影响提取产物纯度）；
4. 向离心管加入0.25倍上清体积的 Buffer SLB，涡旋混匀，冰浴 5min；
5. 12,000 rpm（ ~13,400×g）室温离心5min，吸取上清转移至一新的2mL离心管中，注意不要吸取到 沉淀；
6. 向离心管中依次加入 0.25 倍上清体积 Buffer SGB，0.75 倍上清体积异丙醇（如上清体积600μL，需先加入150μLBuffer SGB 再加入 450μL 异丙醇） ，上下颠倒混匀；
7. 将上一步的混合液全部转入 DNA Spin Column 中（每次加入量不超过 700 µL，若超过 700 µL 可分批加入），12,000 rpm（~13,400×g）室温离心 1 min，弃滤液，将 DNA Spin Column 放入 Collection tube中；
8. 向 DNA Spin Column 中加入 600 μL Buffer SD，12,000 rpm（~13,400×g）室温离心 1 min，弃滤液，将 DNA Spin Column 放入 Collection tube 中；
9. 向 DNA Spin Column 中加入 600 μL Buffer SP（使用前请确认已添加无水乙醇），12,000 rpm（~13,400 ×g）室温离心 1 min，弃滤液，将 DNA Spin Column 放入 Collection tube 中；
10. 向 DNA Spin Column 中加入 600μL PW（使用前请确认已添加无水乙醇），12,000 rpm（~13,400×g）室温离心1min，弃滤液，将 DNA Spin Column 放入 Collection tube 中；
11. 重复步骤 10；
12. 将 DNA Spin Column 重新置于 Collection tube 后，12,000 rpm（~13,400×g）室温离心2min，取出DNA Spin Column 置于新的1.5mL 离心管上；
13. 将 DNA Spin Column 开盖室温放置 5-10min，尽量使残留的乙醇挥发完全；
14. 向 DNA Spin Column 的膜中央悬空加入50-100μL Buffer TE，室温静置2min，12,000 rpm（~13,400 ×g）室温离心 2min，收集 DNA 溶液。若要得到更高浓度的 DNA，也可以将第一次的洗脱液重新加 回至 DNA Spin Column 中，室温静置2min，12,000 rpm（~13,400×g）室温离心 2min，再次洗脱DNA。