急性经口毒性测试仪（霍恩氏法）操作规程-济南乾元仪器

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急性经口毒性测试仪（霍恩氏法） 是基于霍恩氏法（Horn's Method）设计的实验设备，用于评估化学物质通过口腔摄入后的急性毒性。霍恩氏法是一种经典的毒理学方法，通过设定几何级数的剂量组，观察实验动物的死亡情况，计算半数致死剂量（LD₅₀）及其95%置信区间。该方法具有操作简便、计算快捷的优点，但精确度相对较低，适用于初步毒性评估。

霍恩氏法的基本原理

1. 剂量设计：
2. 采用几何级数设置4个剂量组，剂量比值通常为 √10（约3.16） 或 ³√10（约2.15）。例如，剂量组可设为 100、316、1000、3160 mg/kg。
3. 动物分组：
4. 每个剂量组使用相同数量的动物（通常为4-5只），性别一致（常用雌性）。
5. 观察与记录：
6. 染毒后连续观察14天，记录动物的死亡时间及中毒症状。
7. 数据分析：
8. 根据死亡情况，查阅霍恩氏法专用表格，直接查得LD₅₀及其95%置信区间，无需复杂计算。

仪器功能与技术特点

1. 自动化操作：
2. 仪器可自动完成剂量配制、给药、数据记录及分析，减少人为误差。
3. 剂量精准控制：
4. 高精度泵浦系统确保剂量准确性，符合霍恩氏法对剂量间隔的要求。
5. 实时监测：
6. 配备生命体征监测模块，实时记录动物体重、活动状态及死亡时间。
7. 数据分析软件：
8. 内置霍恩氏法计算模块，自动生成LD₅₀报告及剂量-反应曲线。
9. 合规性：
10. 符合国际毒理学标准（如OECD TG 401、GB/T 15670等），满足农药、化学品登记要求。

应用领域

1. 农药与化学品毒性评估：
2. 用于农药、工业化学品、新化学物质的急性经口毒性分级。
3. 药物安全性评价：
4. 评估药物原药及制剂的急性毒性，支持药物研发。
5. 环境毒理学：
6. 检测环境污染物（如重金属、有机污染物）的口服毒性。
7. 食品安全：
8. 评估食品添加剂、农药残留的潜在毒性。

优缺点分析

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注意事项

1. 动物福利：
2. 实验需遵循伦理规范，尽量减少动物使用量，并采用人道终点。
3. 溶剂选择：
4. 受试物需以适宜溶剂配制（如水、玉米油），避免溶剂本身毒性干扰结果。
5. 剂量范围：
6. 预实验需确定合适剂量范围，确保最高剂量导致动物死亡，最低剂量无死亡。
7. 观察周期：
8. 标准观察期为14天，但某些化合物可能需延长观察期以检测迟发性毒性。

替代方法

由于霍恩氏法的局限性，近年来更多采用以下方法：

1. 上下法（Up-and-Down Procedure, UDP）：
2. 通过逐只动物调整剂量，减少动物用量，逐步逼近LD₅₀。
3. 固定剂量法（Fixed Dose Procedure, FDP）：
4. 采用固定剂量组（如5、50、300、2000 mg/kg），减少剂量组数。
5. 体外模型：
6. 如3T3中性红摄取试验（NRU）、人结肠腺癌细胞（Caco-2）模型等，减少动物实验。

结论

急性经口毒性测试仪（霍恩氏法）是毒理学研究中的经典工具，适用于快速筛选化学物质的急性毒性。尽管其精确度有限，但在合规性、操作便捷性方面具有优势。随着3R原则的推广，未来可能更多结合替代方法，以实现更高效、更人道的毒性评估。